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RNA纯化试剂盒图片
产品货号:
WH0053
中文名称:
RNA纯化试剂盒
英文名称:
RNA Purification Kit
产品规格:
20次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒用于从酶反应液(如DNase处理、蛋白酶处理、RNA标记等)中纯化回收RNA,也可用于从其它方式提取获得的RNA的纯化。纯化的总RNA无蛋白质污染,所得的RNA可用于Northern Blot、Dot Blot、mRNA提取、cDNA合成、引物延伸、差异显示等。

本试剂盒使用独特的离心吸附柱,在高盐条件下RNA与硅胶吸附膜高效、专一地结合,同时最大限度除去蛋白质、无机盐离子和许多有机杂质等,在低盐条件下,RNA被洗脱。可处理的RNA样品量为20μg。


RNA纯化试剂盒操作流程图


组分规格
溶液RK10mL
漂洗液RW12mL
RNase-Free ddH2O15mL
RNase-Free吸附柱CR2(含2mL收集管)20套
RNase-Free离心管(1.5mL)20个

保存:室温(15~25℃),有效期1年。


预防RNase污染,应注意以下几方面:
  • 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。
  • 使用RNase-Free的塑料制品和枪头避免交叉污染。
  • RNA在本制品中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用RNase-Free的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4h,塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10min,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
  • 配制溶液应使用RNase-Free ddH2O。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(V/V,放置过夜,高压灭菌)。



第一次使用前在RK中加入β-巯基乙醇至终浓度1%,如1mL RK中加入10μL β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RK 4℃可放置一个月,溶液RK在储存时可能会形成沉淀,如果有沉淀出现,请加热溶解后使用。
第一次使用前应在漂洗液RW中加入无水乙醇,加入量请参见瓶上标签。
以下步骤建议在冰浴中进行。
  • 在RNA样品中加入RNase-Free水补足至100μL,加入350μL溶液RK(使用前请先检查是否已加入β-巯基乙醇),充分混匀。
  • 加入250μL无水乙醇,充分混匀,立即进行下一步。
  • 将上一步所得溶液和沉淀一起转入吸附柱CR2中,12000rpm离心30sec,弃掉收集管中的废液。
  • 向吸附柱CR2中加入500μL漂洗液RW(请先检查是否已加入乙醇),室温放置2min后,12000rpm离心30sec,弃废液,将CR2放入收集管中。
  • 重复操作步骤4。
  • 12000rpm离心5min,去除残余液体。
  • 将吸附柱CR2转入一个新离心管中,加14~20μL RNase-Free水,室温放置2min后,12000rpm离心2min。
    注:
    a.洗脱缓冲液体积不应少于14μL,体积过小影响回收效率。
    b.洗脱液的pH对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0~8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率;且RNA产物应保存在-20℃,以防RNA降解。
  • 要提高RNA得率,可重复上步操作一次,合并两次得到的溶液。

相关搜索:RNA纯化试剂盒RNA纯化回收试剂盒RNA Purification Kit
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